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第12章 发现（第1页）

在地球联邦的秘密研究所内，陈文同志的实验室里，一个历史性的时刻正在悄然发生。

陈文同志，这位年轻的科学家，正站在实验室的中央，他的眼神中闪烁着坚定和期待。

（实在是找不到怎么加粗了，各位如果看到这不想看或者看不懂可以跳过，只要知道实验成功了就好！）

实验的准备

实验设计：陈文同志首先对实验进行了周密的设计。他确保每个环节都能够无缝衔接，以提高实验的成功率。

样本准备：他选择了3288实验后的成果为样本基因，这些细胞将作为基因编辑的受体。细胞被小心地培养在无菌的培养箱中，以确保它们在实验前处于最佳状态。

基因编辑工具的选择：陈文同志决定使用crispr-cas9系统，这是一种广泛用于基因编辑的工具，因其精确性和灵活性而被选中，其实目前有一种trs系统是最适合本次实验的工具，但是倘若使用那个软件之后或许会引起其他人的探究，这是陈文同志目前不能解释和接受的。

设计：为了确保crispr-cas9系统能够精确地靶向耐辐射基因的特定序列，陈文同志设计了特定的导向rna（grna）。他利用生物信息学工具和自己实验模拟出的已知“吞噬者”星球基因序列，设计了能够与目标dna序列完美配对的grna。

cas9蛋白的纯化：cas9蛋白是crispr-cas9系统中的关键切割酶。陈文同志确保所使用的cas9蛋白经过高度纯化，以避免任何可能的污染或活性不足。

供体dna的合成：为了将耐辐射基因整合到人类基因组中，陈文同志合成了含有耐辐射基因的供体dna片段。这些片段将作为基因编辑后的细胞中新基因的来源。

实验条件的优化：陈文同志对实验条件进行了优化，包括温度、ph值、孵育时间和电击转染的参数。他通过预实验确定了最佳条件，以提高基因编辑复合体的传递效率和基因整合的准确性。

安全措施：在处理潜在的危险生物材料时，陈文同志采取了所有必要的安全措施，包括使用个人防护装备和在生物安全柜中进行操作，以防止任何可能的交叉污染或意外暴露。

伦理审查：在开始实验之前，陈文同志确保所有实验步骤都符合伦理标准和联邦法规。他提交了详细的实验方案给伦理委员会，等待审查和批准。

记录和跟踪：为了确保实验的可追溯性和透明度，陈文同志准备了详尽的实验记录，记录了所有实验步骤、使用的材料和观察到的结果。

在进行了这些详尽的准备工作之后，陈文同志进入了实验室，准备开始实验。

实验的执行

实验前的最后检查：在实验开始之前，陈文同志进行了最后的检查，确保所有设备正常运行，包括显微镜、pcr仪、电穿孔设备和细胞培养箱。他检查了所有试剂的质量和浓度，包括grna、cas9蛋白和供体dna。

细胞培养：陈文同志从培养箱中取出了准备好的人类细胞样本。这些细胞在实验前经过了精心的培养和筛选，以确保它们的健康和活力。

crispr-cas9复合体的制备：他将设计好的grna与cas9蛋白混合，形成了crispr-cas9复合体。这个复合体将作为基因编辑的“剪刀”，精确地切割目标dna序列。

电穿孔转染：陈文同志将crispr-cas9复合体和供体dna一起加入到细胞悬液中。他使用电穿孔设备对细胞进行转染，以确保crispr-cas9复合体和供体dna能够高效地进入细胞内部。

孵育和观察：转染后的细胞被放回培养箱中孵育。陈文同志密切观察细胞的状态，确保它们在适宜的温度和ph值下生长。

荧光显微镜检查：数小时后，陈文同志使用荧光显微镜检查细胞。他寻找那些成功整合了耐辐射基因的细胞，这些细胞会显示出特定的荧光标记。

数据记录和分析：陈文同志记录了所有观察到的现象，包括荧光强度和分布模式。他使用这些数据来评估基因编辑的效率和效果。

实时pcr和基因测序：为了进一步确认耐辐射基因的整合和表达，陈文同志进行了实时pcr和基因测序。这些技术可以精确地检测基因编辑后的细胞中耐辐射基因的存在和表达水平。

实验结果的评估：在收集了所有数据后，陈文同志评估了实验结果。他分析了基因编辑的效率、耐辐射基因的表达水平以及任何可能的脱靶效应。

后续实验的规划：基于实验结果，陈文同志规划了后续实验，以进一步优化基因编辑过程和提高成功率。他想到了可能的改进措施，包括调整grna设计、cas9蛋白的浓度和转染条件。

实验的确认

进入了实验的确认阶段，这一阶段对于验证实验的成功与否至关重要。

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