采病犬粪便,直接或加等量pbs后混匀,以3000r离心10。
上清液加等量氯仿振动10,再如前处理一次。
吸取上清液滴于铜网上,用2磷钨酸(phu003d62)负染后电镜检查。
在病的初期可见到大量大小均一的直径20~22n的圆形和六边形散在的病毒粒子,如能进行免疫电镜检查则更佳。
4、病毒分离与鉴定
常接种dck和f81细胞分离病毒,观察细胞病变和核内包涵体。
粪便病料可先离心,再加入高浓度抗生素或过滤除菌,最简便的病毒鉴定方法是接种后3~5d后用荧光抗体检测细胞中的病毒,或测定培养液的血凝性。
5、血清学检查
(1)国内外常用血凝(ha)和血凝抑制(hi)试验;
(2)血凝试验可用于测定粪便和细胞培养物中的病毒效价。
用05~1猪红细胞作指示系统;
(3)试验证明,ha>1:80可作为阳性感染的指标标准;
(4)血凝抑制试验主要用作流行病学调查,也可用于检测粪便中的抗体。
七、防制
1、疫苗注射。
同源疫苗:
犬细小病毒灭活疫苗或弱毒疫苗,比如单价疫苗、二联苗(犬细小病毒病和传染性肝炎)、三联苗(犬瘟热、犬细小病毒病和犬传染性肝炎)和五联苗(犬瘟热、犬细小病毒病、犬传染性肝炎、狂犬病和犬副流感)。目前同源疫苗应用较多。
异源灭活苗:猫泛白细胞减少症灭活疫苗或弱毒苗。
2、严格的检疫制度。
治疗
1、心肌炎型病例转归不良,只要出现心电图变化都难免死亡。
发现肠炎型病例立即隔离饲养,加强护理;
2、采用对症疗法:呕吐注射阿托品等;
3、腹泻口服次硝酸秘、鞠酸蛋白和注射vk、安络血等止血剂;
4、脱水输液,注意先盐后糖,最好静脉注射,先快后慢,有困难时可行腹腔输液;
结膜发绀时则加入碳酸氢钠防止酸中毒,也可口服补液ors;
5、支持疗法和防止继发感染等治疗措施,可能获得痊愈或好转支持疗法:
i静脉输进健康犬或康复犬的全血30~200l
ii也可注射其血清或血浆30~50l
iii还可使用vc、肌苷、atp等以增强支持疗法的效果防止继发感染。
用痢特灵、庆大霉素、红霉素、卡那霉素等抗菌和抑制病毒的药物。
?思考题
·犬细小病毒病的临床症状和病理变化?
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